Валидация фотометрических методик контроля качества нового химического предшественника модифицированных адресных молекул белковой природы для радиофармацевтического лекарственного препарата
| Parent link: | Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация/ Воронежский государственный университет.— , 2004- № 2.— 2020.— [С. 107-114] |
|---|---|
| Other Authors: | , , , , |
| Summary: | Заглавие с экрана Ранее мы предложили способ модификации адресных молекул белковой природы (DARPin9_29) с применением хелатирующего агента сукцинимид-1-ил 6-(бис(пиридин-2-илметил) амино)гексаноата (DPAH-NHS) для эффективного связывания 99mTc. Для нового химического предшественника радиофармацевтического лекарственного препарата - адресных молекул белковой природы с антикириновыми повторами (DARPin9_29), модифицированных хелатирующим агентом (DPAH-DARPin9_29), были предложены методики УФ-спектрофотометрическая (определение показателей «Подлинность» и «Родственные примеси») и колориметрическая - метод Бредфорта (для показателя «Количественное определение») и проведены испытания по оптимизации и валидации методик с учетом состава реагента. В УФ-спектре поглощения 0.001 % испытуемого раствора DPAH-DARPin9_29 в диапазоне 200 - 350 нм наблюдался один максимум при 260 ± 2 нм, который обусловлен наличие фрагмента пиридиновых колец. Для определения родственных примесей предложено проводить пробоподготовку, в которой раствор DPAH-DARPin9_29 экстрагируют гексаном в соотношении 1:1. Оптическая плотность гексанового извлечения при длине волны 260 нм не превышала значения 0.05, предел содержания примеси при этом не превышал 1 мкг/мл (0.0001 %). Колориметрическая методика была адаптирована с учетом состава набора реагента и предложено описание приготовления стандартных, испытуемых и контрольного растворов. Содержание DPAH-DARPin9_29 должно быть в пределах от 0.90 до 1.10 мг/мл (в пересчета на DARPin9_29). Валидаци-онная оценка разработанной методики проведена в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи XIV. Установлено, что по валидационным параметрам (специфичность, линейность, правильность, сходимость и внутрилабораторная прецизионность) методика количественного определения соответствует требованиям, предъявляемым в фармацевтическом анализе. Определено, что градуировочный график имеет линейный характер в диапазоне концентраций DARPin9_29 от 0.2 до 1.0 мг/мл и описывается уравнением y = 0.728»x+0.0148 (r = 0.9950). Предлагаемые фотометрические методики контроля качества могут быть включены в проект нормативной документации на набор реагента для приготовления радиофармацевтического лекарственного препарата «DPAH-DARPin9_29, 99шТс». Earlier, we proposed a method for preparation the targeted protein molecule DARPin9_29 derivate (DPAH-DARPin9_29) using the chelating agent succinimid-1-yl 6- (bis (pyridin-2-ylmethyl) amino)hexanoate for efficient binding of 99mTc. DARPin9_29 is a designed ankyrin repeat protein which is new chemical precursor of the radiopharmaceuticals. UV spectrophotometric methods (the determination of the identification and impurities) and the colorimetric Bradfort method (for the quantitative determination) were proposed. Optimization and validation of the methods were carried out taking into account of the reagent composition. In the UV spectrum of a 0.001% DPAH-DARPin9_29 test solution in the range 200 - 350 nm one maximum was observed at 260 ± 2 nm, which is due to the presence of a fragment of pyridine rings. To determine related impurities, it was proposed to conduct the DPAH-DARPin9_29 solution extraction with hexane in a 1 : 1 ratio. The optical density of the test solution at a wavelength of 260 nm did not exceed 0.05, and the impurity content limit did not exceed 1 pg / ml (0.0001%). The colorimetric method was adapted taking into account the composition of the reagent kit and a description of the preparation of standard, test and control solutions was proposed. The content of DPAH-DARPin9_29 should be in the range from 0.90 to 1.10 mg / ml (in terms of DARPin9_29). A validation assessment was carried out in accordance with the requirements of State Pharmacopoeia XIV It was found that according to validation parameters (specificity, linearity, accuracy, convergence and intralaboratory precision), the analytical technique complies with the requirements for pharmaceutical analysis. It was found that the calibration curve has a linear character in the concentration range of DARPin9_29 from 0.2 to 1.0 mg / ml and is described by the linear regression equation y = 0.728 x x + 0.0148 (r = 0.9950). Proposed photometric quality control procedures may be included in the reagent kit for regulatory documentation project for the preparation of a radiopharmaceuticals «DPAH-DARPin9_29, 99mTc". |
| Published: |
2020
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.elibrary.ru/item.asp?id=43138382 |
| Format: | Electronic Book Chapter |
| KOHA link: | https://koha.lib.tpu.ru/cgi-bin/koha/opac-detail.pl?biblionumber=667371 |