Секреция сигнальных молекул кроветворных ниш в условиях остеогенной дифференцировки мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, индуцированной рельефным кальций-фосфатным покрытием
| Parent link: | Биомедицинская химия: научно-практический журнал.— , 1955- Т. 65, № 4.— 2019.— [С. 339-346] |
|---|---|
| Corporate Author: | |
| Other Authors: | , , , , , , , , , , , , , |
| Summary: | Заглавие с экрана С использованием мультиплекс-набора in vitro в культуре мультипотентных мезенхимных стромальных клеток жировой ткани человека (ММСК-ЖТ) в условиях её остеогенной дифференцировки, обусловленной 14-дневным контактом с кальций-фосфатной (КФ) поверхностью различной шероховатости, изучена секреция ряда цитокинов, хемокинов и факторов роста. Двустороннее рентгеноаморфное КФ-покрытие формировали на образцах из коммерчески чистого титана методом микродугового оксидирования в анодном режиме. Электролит состоял из водного раствора ортофосфорной кислоты (20 масс.%), карбоната кальция (9 масс.%) и нанопорошка (диаметр частиц 10-30 нм с отдельными агрегатами до 100 нм) синтетического гидроксиапатита (6 масс.%). После 4-х пассажей ММСК-ЖТ, выделенные из липоаспирата, сокультивировали в конечной концентрации 1,5?105 жизнеспособных кариоцитов в 1,5 мл стандартной питательной среды (без остеогенных стимуляторов) с образцами в течение 14 (определение [CD45,34,14,20], CD73, CD90 и CD105 иммунофенотипа клеток; анализ секреторной активности) и 21 дней (окраска культуры ализариновым красным) при смене культуральной среды каждые 3-4 дня. Установлено, что в условиях контакта in vitro с КФ-покрытием ММСК-ЖТ дифференцируются в остеобласты, синтезирующие минерализованный костный матрикс. Это сопровождается 2-3-кратным увеличением доли [CD45,34,14,20]+ кроветворных клеток. Сигнальными молекулами для наращивания in vitro гемопоэтического плацдарма в 14-дневной дифференцирующейся трёхмерной культуре ММСК-ЖТ являются гуморальные факторы кроветворных ниш: цитокины leukemia inhibitory factor (LIF) и stem cell factor (SCF) при среднем индексе шероховатости КФ покрытия Ra=2,4-2,6 мкм либо stromal derived factor-1 (SDF-1a (хемокин CXCL12)) при Ra=3,1-4,4 мкм. Using a multiplex kit the secretion of a number of cytokines, chemokines, and growth factors has been investigated in vitro in a culture of human adipose-derived multipotent mesenchymal stromal cells (hAMMSCs) under conditions of their osteogenic differentiation caused by 14-day contact with a calcium phosphate (CP) surface of different roughness. Bilateral X-ray amorphous CP coatings were prepared on the samples of commercially pure titanium in the anodal regime using a microarc method. The electrolyte consisted of aqueous orthophosphoric acid (20 wt %), calcium carbonate (9 wt %), and synthetic hydroxyapatite nanopowder (6 wt %, particle diameter of 10–30 nm with single agglomerates up to 100 nm). hAMMSCs isolated from lipoaspirate were co-cultured after 4 passages with the CP-coated samples at a final concentration of 1.5 ? 105 viable karyocytes per 1.5 mL of standard nutrition medium (without osteogenic stimulators) for 14 days (determination of the [CD45,34,14,20], CD73, CD90, and CD105 cell immunophenotype; analysis of secretory activity) and 21 days (alizarin red S cell culture staining) with medium replacement every 3–4 days. Under conditions of in vitro contact with rough CP coating hAMMSCs differentiated into osteoblasts synthesizing the mineralized bone matrix; this was accompanied by a 2?3-fold increase in the proportion of [CD45,34,14,20]+ hemopoietic cells. The following humoral factors of hemopoietic niches acted as the signal molecules escalating in vitro the hemopoietic base in 14 days of differentiating three-dimensional culture of hAMMSCs: leukemia inhibitory factor (LIF) and stem cell factor (SCF) cytokines in the case of the mean index of CP roughness Ra = 2.4–2.6 µm or stromal derived factor-1 (SDF-1?, CXCL12 chemokine) in the case of Ra = 3.1–4.4 µm. Режим доступа: по договору с организацией-держателем ресурса |
| Language: | Russian |
| Published: |
2019
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://elibrary.ru/item.asp?id=39244209 |
| Format: | Electronic Book Chapter |
| KOHA link: | https://koha.lib.tpu.ru/cgi-bin/koha/opac-detail.pl?biblionumber=663135 |