Адресный токсин на основе направляющего модуля неиммуноглобулиновой природы как новый агент для тераностики
| Parent link: | Современные технологии в медицине.— , 2009- Т. 8, № 4.— 2016.— [С. 7-13] |
|---|---|
| Corporate Author: | |
| Other Authors: | , , , , |
| Summary: | Заглавие с экрана Цель исследования - получение белкового мультифункционального противоопухолевого агента DARPin-mCherry-PE40, обладающего одновременно диагностическим и терапевтическим действием. Материалы и методы. Работа выполнена на клеточной линии аденокарциномы молочной железы человека SK-BR-3. В качестве контроля использована клеточная линия яичников китайского хомячка CHO-К1. Применяли методы генной инженерии, металл-хелатной аффинной хроматографии, конфокальной микроскопии, а также спектрофотометрический МТТ-тест оценки жизнеспособности клеток in vitro. Результаты. Получен адресный белковый мультифункциональный противоопухолевый агент DARPin-mCherry-PE40, включающий адресный HER2-специфичный модуль неиммуноглобулиновой природы DARPin, визуализирующий модуль mCherry и цитотоксический модуль в виде фрагмента псевдомонадного экзотоксина А (PE40). На культуре HER2-положительных клеток показано, что все три домена в составе рекомбинантного белка сохранили свои функциональные свойства - высокую аффинность к опухолевому антигену HER2, флюоресцентность и цитотоксичность. Заключение. Способность полученного адресного противоопухолевого агента DARPin-mCherry-PE40 селективно окрашивать HER2-положительные клетки, а также высокая избирательная цитотоксичность по отношению к этим клеткам делают полученный адресный рекомбинантный белок DARPin-mCherry-PE40 перспективным тераностическим агентом для диагностики и терапии HER2-положительных опухолей человека. The aim of the investigation was to create multifunctional antitumor protein agent DARPin-mCherry-PE40 possessing both diagnostic and therapeutic properties. Materials and Methods. The experiments were carried out on human cell lines of breast adenocarcinoma SK-BR-3. Chinese hamster ovarian cell line CHO-K1 was used as a control. Genetic engineering methods, metal chelate affinity chromatography, confocal microscopy and spectrophotometric MTT test were used to perform the experiments. Results. A multifunctional targeted anticancer protein agent DARPin-mCherry-PE40 consisting of targeted HER2-specific nonimmunoglobulin module DARPin, an imaging module mCherry and cytotoxic module based on a fragment of Pseudomonas exotoxin A (PE40) has been created. Using HER2-positive cells it was shown in vitro that all three domains of the recombinant protein retained their functional qualities - high affinity for HER2 antigen, ability to fluorescence, and cytotoxicity. Conclusion. The ability of the targeted antitumor agent DARPin-mCherry-PE40 selectively stains HER2-positive cells and highly selective cytotoxicity against these cells make this targeted recombinant protein DARPin-mCherry-PE40 a perspective theranostic agent for the diagnosis and treatment of HER2-positive human tumors. |
| Published: |
2016
|
| Series: | Оригинальные исследования |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://dx.doi.org/10.17691/stm2016.8.4.01 |
| Format: | Electronic Book Chapter |
| KOHA link: | https://koha.lib.tpu.ru/cgi-bin/koha/opac-detail.pl?biblionumber=655558 |